تأكيد ضراوة عصيات الجمرة الخبيثة بتفاعل البوليميراز المتسلسل

يُستخدم تفاعل البوليميراز المتسلسل (polymerase chain reaction, PCR) لتأكيد ضراوة Bacillus anthracis، عامل الجمرة الخبيثة (anthrax)، بالتحقق من وجود البلازميدين pXO1 وpXO2 في العزلة.

العينة

يبدأ الفحص من مستعمرة حديثة على الأجار المغذي، يُعلَّق منها قليل من النمو في ماء معقم ويُسخَّن إلى 95 °م عشرين دقيقة ليُستعمل قالبًا للحمض النووي (template DNA).

المبدأ

من البادئات المقترحة للتحقق من البلازميدين pXO1 وpXO2 بادئات Beyer وزملائه (1996) وHutson وزملائه (1993). وللاحتمال النادر أن تفتقر العزلة إلى البلازميدين معًا، تنص WOAH على إجراء واسم كروموسومي أيضًا. ووُجد أن هلام الأغاروز بتركيز 2% هو الأنسب لهذه القطع الصغيرة.

تفسير النتيجة وحدوده

بادئات هذا الاختبار قد لا تناسب الكشف المباشر عن B. anthracis في العينات الحيوانية أو البيئية نفسها، رغم نجاحها مع المزارع النقية المعزولة منها.

مقارنة بالاختبارات الأخرى

بحسب WOAH، يتوقف اختيار اختبار PCR بعينه على ملاءمته للغرض وعلى مصدر المادة الأولية، عزلةً كانت أو عينة سريرية أو بيئية، وعلى الحاجة إلى التفريق عن أنواع Bacillus الأخرى أو سلالات اللقاح، أو إلى تأكيد هوية العزلة.