ما الذي يكشفه أو يقيسه
مقايسة استقطاب التألق (fluorescence polarisation assay, FPA) طريقة بسيطة لقياس التفاعل بين المستضد والأجسام المضادة تعطي تقديراً لمحتوى المصل منها، وهي سريعة جداً لأنها مقايسة متجانسة (homogeneous assay) لا تُفصل فيها المواد المقيسة بعضها عن بعض.
العينة
العينة في هذه المقايسة مصلٌ مخفَّف يُضاف إليه المستضد.
المبدأ
المستضد المستخدم في تشخيص داء البروسيلات بهذه المقايسة جزء صغير الوزن الجزيئي (متوسطه 22 كيلودالتون) من عديد السكاريد O (O-polysaccharide, OPS) في عديد السكاريد الشحمي الأملس (smooth lipopolysaccharide, S-LPS) للسلالة B. abortus S1119-3، يُوسم بإيزوثيوسيانات الفلوريسين (fluorescein isothiocyanate, FITC). وترتفع درجة الاستقطاب (mP) حين ترتبط المقتفيات (tracers) الموسومة بالتألق بأجسام IgG المضادة للبروسيلات الجائلة في أمصال الحيوانات المصابة، إذ يتقيّد دوران المعقد المناعي الكبير الوزن الجزيئي الناتج، بخلاف المقتفي الحر الذي يصدر ضوءاً غير مستقطب لسرعة دورانه؛ هذا ما بيّنته دراسة نُشرت عام 2024 استعملت مقتفيات من قليل السكاريد (oligosaccharide). وخلافاً لطريقة متجانسة أخرى كاختبار روز البنغال (rose bengal test, RBT)، تحتاج كل عينة هنا إلى قراءة للخلفية (blank/background read) قبل إضافة المستضد، فالمقايسة إذن من خطوتين: قراءة أولى تستغرق دقيقتين إلى ثلاث، ثم قياس لمحتوى الأجسام المضادة بجهاز محلّل لاستقطاب التألق (fluorescence polarisation analyser) يُحصل عليه بعد نحو دقيقتين من إضافة المستضد.
تفسير النتيجة
تُعطى القراءة بوحدات الاستقطاب الملّي (millipolarisation units, mP)، وتدل القراءة التي تتجاوز العتبة المعتمدة على تفاعل إيجابي، والعتبة المعتادة بين 90 و100 وحدة، على أن دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) ينص على معايرة الاختبار محلياً مقابل الأمصال المرجعية القياسية المقابلة لدى المنظمة. تكاد الحساسية والنوعية التشخيصيتان لهذه المقايسة في داء البروسيلات البقري تطابقان نظيرتيهما في مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم التنافسية (competitive ELISA, C-ELISA)، وهي تحدّ من التفاعلات الناجمة عن الأجسام المضادة المتبقية بعد التحصين دون أن تزيلها كلياً. أما التفاعلات المصلية الإيجابية الكاذبة (false positive serological reactions, FPSR) فقد ثبت بوضوح أن المقايسة لا تحل مشكلتها في الخنازير، في حين لا تزال نوعيتها في ظروف هذه التفاعلات غير معروفة حالياً في الأبقار والمجترات الصغيرة.