يكشف اختبار تثبيت المتممة (complement fixation test, CFT) الأجسام المضادة المثبِّتة للمتممة في المصل، مستعملًا مزيجًا من مستضدَّي الطورين الأول والثاني محضَّرًا من سلالة بشرية أو من سلالة Nine Mile لبكتيريا Coxiella burnetii المسببة لحمى كيو (Q fever).
المبدأ
يُجرى CFT بطريقة دقيقة للتثبيت على البارد من نوع كولمر (Kolmer) في صفائح معايرة دقيقة من 96 بئرًا ذات قاع على شكل U. يمر التفاعل بمرحلتين، يُمزج في أولاهما المستضد مع الأجسام المضادة المثبِّتة للمتممة ويُحضن المزيج طوال الليل عند 4°م. يمنع تثبيت المتممة على معقد المستضد والجسم المضاد في المرحلة الأولى انحلالَ كريات الدم الحمراء، أما في غياب الأجسام المضادة المثبِّتة للمتممة فتحلّ المتممة كريات الدم الحمراء المحسَّسة.
تفسير النتيجة
يتناسب معدل الانحلال الدموي عكسيًا مع مستوى الأجسام المضادة النوعية في مصل العينة. تميّز العيارات الواقعة بين 1/10 و1/40 العدوى الكامنة، في حين تكشف العيارات البالغة 1/80 أو أكثر، في مصل واحد أو أكثر من مجموعة تضم خمسة إلى عشرة حيوانات، عن طور نشط من العدوى.
مقارنة بالاختبارات الأخرى
يُعدّ CFT أقل حساسية من مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) ومن اختبار التألق المناعي غير المباشر (IFA)، وقد تراجع استعماله في التشخيص البيطري.