عزل فيروس طاعون المجترات الصغيرة في زرع الخلايا

ما الذي يكشفه الاختبار

عزل الفيروس (virus isolation) طريقة حاسمة في تشخيص طاعون المجترات الصغيرة (peste des petits ruminants, PPR)، وإن كان مرهقاً ويستهلك الجهد والوقت.

العينة

لتوقيت جمع العينات أهمية في الوصول إلى التشخيص بالعزل، ويجعل دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) الوقت المناسب لجمعها الطورَ الحاد من المرض حين تكون العلامات السريرية ظاهرة؛ أما المادة المشتبه بها التي تُلقَّح بها الزروع فقد تكون مادة مسحات أو طبقة بيضاء (buffy coat) أو معلقات نسيجية بتركيز 10%.

المبدأ

لا ينجح العزل دائماً من التمريرة الأولى، وقد يتطلب عدة تمريرات عمياء (blind passages)، سواء أُجري في خلايا الكلى أو الرئة الأولية المأخوذة من الحملان أو في بعض خطوط الخلايا مثل Vero وB95a، وهي أوساط يمكن أن يُعزل فيها فيروس طاعون المجترات الصغيرة (PPRV). بعد تلقيح الزروع أحادية الطبقة (monolayer) بالمادة المشتبه بها تخضع للفحص كل يوم، والعلامة المنتظرة هي التأثير الممرض للخلايا (cytopathic effect, CPE)، الذي قد يتطور خلال 5 أيام.

تفسير النتيجة

في خلايا كلى الحملان وفي الخطوط الخلوية المعبِّرة عن جزيء تنشيط الخلايا اللمفاوية الناقل للإشارة (signalling lymphocyte activation molecule, SLAM)، وهو مستقبِل الفيروسات الحصبية، يتجلى هذا التأثير في تكوُّر الخلايا وتجمّعها، وصولاً إلى تكوين المخالي (syncytia)، ومفتاح التعرف على المخلاة ترتيب أنويتها في شكل دائري يشبه «وجه الساعة».