اختبار تحييد فيروس طاعون المجترات الصغيرة

ما الذي يكشفه الاختبار

يقيس اختبار تحييد الفيروس (virus neutralisation test, VNT) قدرة المصل على تحييد فيروس طاعون المجترات الصغيرة (PPRV)، ووجود الأجسام المضادة لدى الماعز والأغنام المصابة يدعم تشخيصاً قائماً على العلامات السريرية، مع أن هذه الأجسام قد تنشأ أيضاً عن التحصين بأي من لقاحات الفيروس الحالية.

المبدأ

يُتخذ التأثير الممرض للخلايا (cytopathic effect, CPE) دليلاً في هذا الاختبار: فالبئر التي حيَّد فيها المصلُ الفيروسَ في أثناء الاختبار تخلو منه، وأي درجة منه تعني أن التحييد لم يحدث. تُفضَّل خلايا Vero لإجراء الاختبار ويمكن استعمال خلايا كلى الحملان الأولية أيضاً، أما الاختبار القياسي فيُجرى الآن عادةً في صفائح معايرة دقيقة ذات 96 بئراً مع إمكان اللجوء إلى زروع الأنابيب الدوارة (roller-tube)؛ ويتميز بالحساسية والنوعية غير أنه يستغرق وقتاً. ومن مستلزماته معلق خلوي بتركيز 600,000 خلية/مل، ووسط زرع كامل، والأمصال المراد معايرتها بعد تعطيلها بالتسخين إلى 56 درجة مئوية مدة 30 دقيقة، والفيروس مخففاً ليعطي 1000 و100 و10 و1 TCID50 في كل مليلتر.

تفسير النتيجة

تُظهر آبار شاهد الفيروس، وجرعاتها محسوبة لكل بئر، ما إذا كان التخفيف قد أُجري بصورة صحيحة: فعندها يظهر التأثير الممرض للخلايا (CPE) في جميع الآبار التي تحوي 100 و10 TCID50 في البئر الواحدة، وفي نصف الآبار التي تحوي 1 TCID50 في البئر، ولا يظهر في أي بئر تحوي 0.1 TCID50. والعيار المحيِّد هو تخفيف المصل الذي يحيِّد الفيروس في نصف الآبار، ويعدّ دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) العيارَ الذي يزيد على 10 إيجابياً. ويذكر دليل MSD أن هذا الاختبار يمكن أن يؤكد العدوى إذا أظهرت عينتا مصل مزدوجتان من حيوان ناجٍ ارتفاعاً في العيار بمقدار 4 أضعاف أو أكثر، أما الاكتفاء بعينة واحدة للتشخيص المصلي فيذكر مصدر آخر أنه قد يكون ممكناً في البلدان الخالية من المرض، خلافاً للمناطق الموبوءة التي تلزم فيها عينتان مزدوجتان وارتفاع في العيار.