العينة
العينة في هذه الاختبارات حليبٌ يؤخذ من خزان التجميع (bulk tank) الذي تُسهم أبقار القطيع الحلوب بحليبها فيه.
المبدأ
تظهر في اختبار الحلقة اللبنية (milk ring test, MRT) حلقة مميزة في طبقة القشدة حين تتجمع فيها البروسيلا الملساء المصبوغة، بعد أن تكتّلها أجسام مضادة من صنفي IgA وIgM، ومن IgG بدرجة أقل، تلتصق بكريات الدهن في حليب البقر عبر مناطقها Fc. يُعلَّق مستضد اختبار الحلقة اللبنية في نهاية تحضيره في محلول صبغة الهيماتوكسيلين (haematoxylin)، وذلك بعد طرد مركزي لمعلّق مركّز من خلايا مقتولة تعود إلى إحدى سلالتي B. abortus، وهما S99 وS1119-3.
متى يُستخدم
يُعدّ فحص حليب خزان التجميع وسيلة فعّالة لتحرّي قطعان الأبقار الحلوب، وتمتاز فيه مقايسة ELISA غير المباشرة للحليب بالحساسية والنوعية وبقيمة خاصة في فحص القطعان الكبيرة، وحين لا تتوفر يَعُدّ دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) اختبار الحلقة اللبنية بديلًا ملائمًا، وإن كانت موثوقية حساسيته تقل في القطعان التي تضم أكثر من 100 بقرة حلوب. يقتصر استخدام اختبار الحلقة اللبنية على الأبقار، في حين استُخدمت مقايسات ELISA مع حليب الجاموس المائي (water buffalo) والإبل. فإلى جانب مقايسات ELISA، نُشرت لحليب الإبل صيغة معدّلة من اختبار الحلقة، غير أن مراجعة نقدية لطرق تشخيص داء البروسيلات في الإبل ترى أن الفروق التي رصدتها تثير شكوكًا قوية في جدوى اختبار الحلقة اللبنية في حليبها.
تفسير النتيجة
إذا جاءت نتيجة حليب الخزان إيجابية فيقضي الدليل بفحص دم جميع الأبقار التي أسهمت بحليبها فيه. قد تظهر تفاعلات إيجابية كاذبة في ثلاث حالات:
- الأبقار التي حُصّنت قبل أقل من أربعة أشهر من الفحص؛
- العينات التي تحتوي حليبًا غير طبيعي كاللبأ (colostrum)؛
- حالات التهاب الضرع (mastitis).