مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم التنافسية (C-ELISA) لداء البروسيلات

multiple species2 cited sources

المبدأ

تقوم مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم التنافسية (competitive ELISA, C-ELISA) على تنافس بين طرفين على عديد السكاريد O (O-polysaccharide, OPS): الأجسام المضادة التي تولّدها العدوى في المصل المفحوص، ومقترن إنزيمي لجسم مضاد وحيد النسيلة (monoclonal antibody, MAb) موجَّه ضد عديد السكاريد هذا، وهذا المقترن هو ما يختلف من مجموعة تجارية إلى أخرى، وما تقيسه المقايسة هو مقدار ارتباطه. بفضل هذا التصميم لا تحتاج C-ELISA إلى مقترن مضاد للغلوبولين المناعي، فتتجاوز بعض قيود ELISA غير المباشرة (I-ELISA)، غير أن اختيار الجسم المضاد وحيد النسيلة، بما له من نوعية وألفة، يترك أثرًا واضحًا في أدائها التشخيصي. تتباين صيغ المقايسة في سلالة البروسيلا الملساء التي يُحضَّر منها المستضد، وفي نوع المستضد نفسه (عديد السكاريد الشحمي الأملس، smooth lipopolysaccharide, S-LPS، أو OPS)، وفي مقترنات الإنزيم والركائز أو مولدات اللون، وقد وُصف عدد منها للأبقار والمجترات الصغيرة والجمليات والخنازير.

متى يُستخدم

لموثوقيتهما الأعلى عمومًا من اختبار روز البنغال (rose bengal test, RBT) واختبار تثبيت المتممة (complement fixation test, CFT)، ولإمكان إجرائهما على مصول رديئة الجودة أو متحللة الدم (haemolysed)، تبدو مقايستا ELISA التنافسية وغير المباشرة مفيدتين في المسوح المصلية الوبائية على الحيوانات البرية.

تفسير النتيجة

يُدرج في كل صفيحة شاهد إيجابي وآخر سلبي، ويشترط دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) تحديد مجالات الكثافة الضوئية (optical density, OD) المقبولة لهذين الشاهدين معيارًا للحكم على صلاحية نتائج الصفيحة. يرجّح الدليل بقوة أن ما تكسبه C-ELISA من نوعية يأتي من انخفاض حساسيتها قياسًا باختبار مستضد البروسيلا المُنظَّم (BBAT) وELISA غير المباشرة؛ أما التفاعلات الناجمة عن الأجسام المضادة التي يولّدها التحصين فقد تقللها المقايسة دون أن تزيلها كليًا. تتوفر مجموعات تجارية عدة من C-ELISA بعضها أقل حساسية أو نوعية من غيره، فلا تتطابق نتائج المقايسات المختلفة دائمًا، ولا ينبغي بحسب الدليل قراءة نتائجها بمعزل عن استراتيجيات تأكيدية أو تكميلية مناسبة، شأنها في ذلك شأن اختبار روز البنغال وBBAT وتثبيت المتممة وELISA غير المباشرة.

How this test is classified