يكشف تفاعل البوليميراز المتسلسل (polymerase chain reaction, PCR) الحمض النووي للفيروس الطليعي (provirus) لفيروسَي الميدي-فيسنا والتهاب المفاصل والدماغ في الماعز، وتُستخدم مقايساته روتينيًا في مختبرات كثيرة للكشف السريع عن سلالات فيروسات المجترات الصغيرة البطيئة وتحديدها. تذكر المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أن تقنيات PCR القياسية التي تكشف الحمض النووي الطليعي في الخلايا والأنسجة تُستخدم عمومًا اختباراتٍ تكميلية لتحديد حالة العدوى لدى الحيوانات التي لا يمكن تشخيصها نهائيًا بالاختبارات المصلية.
الصيغة الكمية ودور PCR في اختيار الاختبار المصلي
تستخدم بعض المختبرات تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي أو الكمّي، وهو يحدد حالة العدوى ويقيس فوق ذلك كمية الفيروس الطليعي لدى الحيوان. توفر التقنيات الجزيئية مثل PCR والاستنساخ والتسلسل معرفة بسلالات الفيروسين الخاصة ببلد أو منطقة، وقد تؤثر هذه المعرفة في اختيار الاختبار المصلي والمستضد المرافق له.
التحقق من النوعية
تنص المنظمة العالمية لصحة الحيوان على فحص ناتج PCR المضخَّم بالتهجين أو بأنماط الهضم بإنزيمات القطع أو بالتسلسل، تحسبًا لنتائج إيجابية كاذبة مصدرها تضخيم تسلسلات غير ذات صلة من الحمض النووي الجيني للعائل. يُعدّ استنساخ نواتج PCR أو تحديد تسلسلها أو كلاهما الطريقة الأكثر مباشرة لتأكيد نوعية النتائج. يقدّم التسلسل أفضل دليل على النوعية عند المصادقة على الاختبارات القائمة على PCR، وهو ما توصي به المنظمة العالمية لصحة الحيوان.
صيغ أخرى للتضخيم
يمكن أن يحسّن PCR المتداخل (nested PCR) حساسية الاختبارات القائمة على PCR. طُبّق التضخيم متساوي الحرارة بوساطة الحلقة (loop-mediated isothermal amplification, LAMP) مؤخرًا على كشف الفيروس الطليعي لالتهاب المفاصل والدماغ في الماعز.