اختبار الإليزا التنافسي على الطور الصلب لفيروس الحمى القلاعية

ما الذي يكشفه

اختبار الإليزا التنافسي على الطور الصلب (solid-phase competition ELISA, SPCE) من اختبارات الإليزا التنافسية التي تستعمل أضدادًا خاصة بالنمط المصلي، والطريقة الموصوفة منه في دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) تصلح لكشف الأضداد الموجهة إلى كل واحد من الأنماط المصلية السبعة لفيروس الحمى القلاعية.

المبدأ

يؤدي دور الضد اللاقط (trapping antibody) مصل أرانب مضاد للمستضد 146S لأحد الأنماط السبعة، بتركيز أمثل محدد مسبقًا في محلول منظِّم من الكربونات والبيكربونات بدرجة pH 9.6. وتحضير المستضد مأخوذ من إجراءات تصنيع اللقاحات: فيروسات تُكثَّر في المزارع الخلوية وتُعطَّل بالإيثيلين إيمين (ethyleneimine). ويؤدي دور الضد الكاشف (detecting antibody) مصل خنازير غينيا المحضَّر بحقنها بالمستضد 146S لأحد الأنماط السبعة، بعد حجبه المسبق بمصل NBS. ويمكن بدلًا من أمصال خنازير غينيا أو الأرانب استعمال أضداد وحيدة النسيلة (MAbs) مناسبة، إما مغطاة على أطباق الإليزا ضدًّا لاقطًا وإما مقترنة بالبيروكسيداز ضدًّا كاشفًا.

متى يُستخدم

تتوفر مجموعات تجارية قائمة على الأضداد وحيدة النسيلة للأنماط O وA وAsia 1 وSAT 2، بصيغة مختلفة لكن بخصائص أداء متقاربة. ويتميز هذا الاختبار عن الإليزا الحاجب في الطور السائل (liquid-phase blocking ELISA, LPBE) بنوعية أعلى، مع حساسية مماثلة.

تفسير النتيجة

في مختبر WOAH المرجعي في Pirbright، ولأغراض إثبات الخلو من العدوى في مجموعة حيوانية لم تتعرض للفيروس (naïve)، تُعدّ نسبة التثبيط التي تتجاوز 60% إيجابية للنمط O في جميع الأنواع. ويذكر دليل WOAH أنه حين تُطلب أقصى حساسية، كإصدار شهادات لحيوانات مفردة لأغراض التجارة الدولية، قد يُحدَّد نطاق غير حاسم بين 40% و60%.