الإليزا غير المباشرة لكشف أجسام IgG المضادة لفيروس متلازمة الشرق الأوسط التنفسية

camelids (Camelidae)dromedary camels1 cited sources

تكشف الإليزا غير المباشرة (indirect IgG ELISA) الأجسام المضادة لفيروس متلازمة الشرق الأوسط التنفسية (MERS-CoV)، وتصفها المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) بأنها اختبار موثوق وحساس. تُعد إليزا IgG اليوم أوسع التقنيات استخدامًا لكشف الأجسام المضادة للفيروس، وقد طُوّرت منها عدة صيغ إحداها متاحة تجاريًا.

المبدأ

تُغلَّف آبار صفيحة الإليزا ذات 96 بئرًا ببروتين S1 المأشوب بتركيز 1 ميكروغرام/مل، وتُترك طوال الليل عند 4 درجات مئوية. تُخفَّف أمصال الفحص والأمصال الضابطة، الإيجابية والسالبة، بنسبة 1/100 في محلول الحجب. تُحضن الآبار بعد ذلك بمقترن بيوتيني من الماعز مضاد لأجسام اللاما (goat anti-llama). يُوقَف التفاعل بمحلول إيقاف، وتُقرأ الصفائح بقارئ إليزا عند طول موجي 450 نانومترًا.

حدود التفسير

قد تُصاب الإبل الإيجابية مصليًا بالعدوى أيضًا، غير أن تكاثر الفيروس وحمله يكونان عمومًا أقل لدى الحيوانات المصابة الإيجابية مصليًا مقارنة بالإبل السلبية مصليًا (Meyer et al., 2016).

السلامة الحيوية

تحمل العينات المأخوذة من الحيوانات لفحص الأجسام المضادة احتمال وجود فيروس حي، وتوصي WOAH بأن تُطبَّق عليها خطوات تعطيل مناسبة.

How this test is classified