اختبار التعادل بالجسيمات الكاذبة لفيروس متلازمة الشرق الأوسط التنفسية

camelids (Camelidae)dromedary camels1 cited sources

يستخدم اختبار التعادل بالجسيمات الكاذبة (pseudo-particle neutralisation assay) جسيمات تعبّر عن بروتين الشوكة (spike) الكامل لفيروس متلازمة الشرق الأوسط التنفسية (MERS-CoV)، ويبحث بها عن الأجسام المضادة المعادِلة النوعية للفيروس. تذكر المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أنه مخصص لتحري عينات المصل القادرة على تحييد الفيروس.

العينة

يُجرى الاختبار على عينات مصل تُخفَّف كل منها 20 مرة.

المبدأ

تُصنع الجسيمات الكاذبة المستخدمة في هذا الاختبار من بلازميدين هما pNL Luc-E-R- وpcDNA-S، وهما متوفران عند الطلب (Perera et al., 2013). يُعايَر مخزون الجسيمات قبل الاستخدام، ويُعتمد في اختبار التعادل التركيز الأكثر تخفيفًا من بين التراكيز التي تعطي أعلى نشاط لإنزيم اللوسيفيراز (luciferase) في هذه المعايرة. بعد 72 ساعة من إصابة الخلايا، يُقاس نشاط اللوسيفيراز فيها باستخدام مجموعة تجارية متاحة، وهو المؤشر الذي تُبنى عليه القراءة.

تفسير النتيجة

حدّ القطع في هذا الاختبار هو تثبيط يبلغ 90% من متوسط نشاط اللوسيفيراز المسجل في الضوابط الإيجابية.

مقارنة باختبار التعادل الفيروسي

يخلو هذا الاختبار من أي فيروس معدٍ، على خلاف اختبار التعادل الفيروسي القياسي لفيروس متلازمة الشرق الأوسط التنفسية، ويمكن إنجاز العمل فيه كله بأمان في مختبر قياسي من مستوى السلامة الحيوية 2 (biosafety level 2).

How this test is classified