يستهدف هذا الاختبار المنطقة الواقعة أعلى جين البروتين E (upstream of E, UpE) في فيروس متلازمة الشرق الأوسط التنفسية (MERS-CoV)، وتوصي به المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) اختبارًا للتحري. يستند البروتوكول الذي توصي به WOAH إلى الطريقة التي وصفها كورمان وزملاؤه (Corman et al., 2012a).
استخلاص الحمض النووي الريبي
أمام تعدد طرق عزل الحمض النووي الريبي الموصوفة وكثرة المجموعات التجارية المتاحة، تضع WOAH لخطوة الاستخلاص شرطين: أن تلائم العينة المفحوصة، وأن يُتحقق من صلاحيتها في المختبر.
برنامج التضخيم
يتضمن برنامج المدوّر الحراري 20 دقيقة عند 55 درجة مئوية و3 دقائق عند 95 درجة، تليها 45 دورة تضم كل منها 15 ثانية عند 95 درجة و30 ثانية عند 58 درجة مئوية.
تفسير النتيجة وحدوده
لا تُعد النتائج صالحة إلا إذا أعطى الضابط الإيجابي منحنى تضخيم ولم يظهر أي منحنى في الضابط السالب. يصعب ربط نتائج هذا الإجراء كميًا بعيار الفيروس، بسبب عدم التوازن بين النسخ الجينومية ودون الجينومية (Corman et al., 2012a). المرجع في قراءة نتائج اختبار UpE قيمةُ دورة عتبة (Ct) يضعها المختبر نفسه، فتوصية WOAH أن يحدد كل مختبر هذه القيمة بمادة مرجعية مناسبة.