السموم الفطرية المسببة للرعاش (tremorgenic mycotoxins) مستقلبات ثانوية تنتجها فطريات من أجناس Penicillium وAspergillus وClaviceps وNeotyphodium، بحسب نوفوتنا وزملائه (2023)، ومنها البينيتريم أ (penitrem A) والروكفورتين C (roquefortine C). يذكر نوفوتنا وزملاؤه (2023) أن أغلب حالات التسمم في الكلاب والقطط تنتج عن أكل طعام عفن يحوي البينيتريم أ والروكفورتين C، وهما سمّان يرتبطان في الغالب بفطر Penicillium crustosum المسؤول عن تلف الطعام.
ما الذي يكشفه الاختبار
يُعدّ البينيتريم أ، بحسب هارت وزملائه (2026)، أقوى السموم الفطرية المسببة للرعاش وأهمها سريرياً، وهو مركّب إندولي ديتربيني محبّ للدهون يعبر الحاجز الدموي الدماغي بسهولة. حلّل هارت وزملاؤه في خمس حالات كلبية عدة سموم فطرية عصبية، هي البينيتريمات من أ إلى و، والباكسيلين، وحمض ألفا-سيكلوبيازونيك، وقلويدات الإرغولين. استخدم نوفوتنا وزملاؤه في حالة تسمم كلبية طريقة كروماتوغرافيا سائلة فائقة الأداء مع مطيافية كتلة تفاعلية (UHPLC-MS/MS) تستهدف 56 مستقلباً فطرياً سامّاً، ووجدوا في عينتين تراكيز معتبرة من البينيتريم أ والباكسيلين والروكفورتين C.
العينة
أخذ هارت وزملاؤه من الكلاب عينات من محتوى المعدة، بالقيء المستحث أو بغسل المعدة، ومن مصل الدم عند توافره. وجد هارت وزملاؤه في المصل مستويات ضئيلة فقط من البينيتريم أ والباكسيلين وحمض ألفا-سيكلوبيازونيك، وحلّلوا مصل الكلاب من الثالث إلى الخامس بالكروماتوغرافيا السائلة مع مطيافية الكتلة التفاعلية (LC-MS/MS) وحدها لأن حساسية طرق المقايسة المناعية الإنزيمية (EIA) عُدّت غير كافية. يطلب مختبر التشخيص البيطري في جامعة ولاية أيوا ذكر القلق من السموم الفطرية المسببة للرعاش في تاريخ الحالة، والاتصال بالمختبر قبل إرسال العينة.
مبدأ الاختبار
تعتمد الدراسات المنشورة حتى الآن في الكشف عن هذه السموم على طرق كروماتوغرافية، وفي السنوات الأخيرة على LC-MS/MS حصراً، بحسب هارت وزملائه. أُجري الزرع الفطري في دراسة هارت وزملائه بالتلقيح بثلاث نقاط على أجار خلاصة الشعير وأجار خلاصة البطاطس وأجار سابورو دكستروز المضاف إليه كلورامفينيكول. حُدّدت العزلات حتى مستوى النوع بتحليل تسلسل منطقة ITS وجزء من جين بيتا-توبيولين، وعُزل فطر P. crustosum المنتج للبينيتريم من محتوى المعدة في الكلاب الخمسة جميعها.
الاستعمالات
يشجّع مختبر التشخيص البيطري في جامعة ولاية أيوا عملاءه على طلب فحص السموم بمطيافية الكتلة في حالات النفوق التي يُشتبه في أن سببها التعرض للسموم الفطرية المسببة للرعاش. تتعرض الكلاب خاصة لهذا التسمم، بحسب هارت وزملائه، بسبب سلوكها في الأكل العشوائي الانتهازي الذي يقودها غالباً إلى ابتلاع أغذية متعفنة أو متحللة. يصف هارت وزملاؤه علامات التسمم في الكلاب بأنها رعاش معمّم حاد البدء يرافقه رنح وفرط حساسية للمنبهات الخارجية. يرى هارت وزملاؤه أن تأكيد التشخيص في الممارسة البيطرية ما زال صعباً، جزئياً لغياب طرق روتينية بسيطة، وأن الاختبارات السريعة في موضع الحالة ومقايسات EIA التي تلائم الممارسة لم تكن متاحة تجارياً لهذا الغرض. يخلص مؤلفو دراسة الكلاب الخمسة إلى أن مقايسة EIA أداة فحص سريعة وقليلة الكلفة وموثوقة للكشف عن السموم الفطرية في محتويات المعدة والمصل. يرى هارت وزملاؤه في الزرع الفطري دليلاً مكمّلاً في الحالات ذات الأهمية الجنائية، وإن كان لا يلائم الممارسة البيطرية الروتينية.
تفسير النتيجة
في الكلاب الخمسة التي درسها هارت وزملاؤه، جاءت مقايسة EIA على محتوى المعدة إيجابية للبينيتريم أ في جميع العينات، وإيجابية للباكسيلين وحمض ألفا-سيكلوبيازونيك وقلويدات الإرغولين في بعضها، وأكدت LC-MS/MS وجود البينيتريمات من أ إلى و والباكسيلين وحمض ألفا-سيكلوبيازونيك. يشير هارت وزملاؤه إلى أن أعراض التسمم بالسموم الفطرية المسببة للرعاش تشبه ما يُلاحظ بعد ابتلاع مبيدات القوارض التي تحوي ألفا-كلورالوز. تتشابه علامات التسمم بالسموم الفطرية المسببة للرعاش، بحسب نوفوتنا وزملائه، مع علامات تسممات أخرى، منها الستركنين والميتالدهيد والإيثيلين غليكول والإيفرمكتين والفوسفات العضوية والكارباماتات والزانثينات.