تعدّ المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) مقايسات الهضم الإنزيمي الإجراءات الوحيدة الموصى بها للكشف عن يرقات Trichinella، مسبب داء الشعرينات (trichinellosis; Trichinella spp.)، في النسيج العضلي. توصي WOAH بطرق الهضم لفحص الذبائح الفردية لحيوانات الغذاء كالخنازير والخيول والطرائد.
المبدأ
تجمع طرق الهضم الاصطناعي بين الهضم الإنزيمي لعينات عضلية فردية أو مجمّعة والتجانس الميكانيكي أو الفرم والتحريك والحضن.
العينة والحساسية
تتسع كل مقايسة هضم في فحوص سلامة الغذاء لما يصل إلى 100 غ من النسيج العضلي. تبلغ حساسية الهضم الاصطناعي لعينة من 1 غ نحو ثلاث يرقات لكل غرام من النسيج (lpg)، وترتفع إلى يرقة واحدة لكل غرام عند فحص 5 غ. تتوقف حساسية طرق الفحص المباشر على كمية النسيج المفحوص وموضع أخذ العينة، وتبلغ هذه الطرق أعلى حساسيتها في العينات الطازجة.
الإجراء
يُحضَّر محلول الهضم لكل 100 غ من اللحم بإضافة 16 مل من حمض الهيدروكلوريك بتركيز 25% إلى لترين من ماء الصنبور المسخّن إلى 45 ± 2°C، ويوضع الدورق على صفيحة تحريك مغناطيسية مسخّنة أو في حاضنة عند الحرارة نفسها. تذكر WOAH أن زمن الهضم يمكن إطالته إذا بقيت قطع عضلية غير مهضومة، على ألا يتجاوز مجموعه 60 دقيقة. يُعد الهضم مُرضياً إذا كان الحطام المتبقي على المنخل في معظمه نسيجاً غير عضلي غير قابل للهضم، كاللفافة والنسيج الضام، لا يزيد على 5% من كتلة العينة الأصلية.
تأكيد اليرقات وتمييزها
تشترط WOAH تأكيد أي يرقة مشتبه بها بفحص تفاصيلها الشكلية بتكبير أعلى مثل 40×. يُعد الجسيم الخيطي (stichosome) أبرز ما يميز يرقات Trichinella، وهو سلسلة من الخلايا القرصية تبطن المريء وتشغل النصف الأمامي من جسم الدودة.
أبكر موعد للكشف
تستطيع طرق الفحص المباشر كشف الحيوانات المصابة بدءاً من 17 يوماً بعد التعرض، وهو الوقت الذي تصبح فيه اليرقات العضلية معدية لمضيف جديد.
متابعة العينة المجمّعة الإيجابية
توصي WOAH، عند إيجابية عينة مجمّعة من عدة حيوانات، بإعادة الهضم على مجموعات من عدد أقل من الحيوانات ثم على الحيوانات فرادى لتحديد المصاب منها.
مقارنة بالاختبارات الأخرى
تعدّ WOAH طريقة الضغط (trichinoscopy) أقل حساسية من الهضم الاصطناعي، ولا توصي بها اختباراً موثوقاً لفحص الذبائح لأغراض سلامة الغذاء أو الترصد.
السلامة الحيوية
تذكر WOAH أن العدوى تنتقل بابتلاع اليرقات العضلية الموجودة في الأنسجة أو المحرَّرة بالهضم الاصطناعي، وأن خطر العدوى المكتسبة في المختبر ضئيل للمحللين إذا اتُّبعت الممارسات المخبرية الجيدة.