تحليل الأفلاتوكسين (Aflatoxin) اختبار مخبري يفتّش عن هذه السموم الفطرية في العلف والحليب وفي بعض الأنسجة، ويدخل في تشخيص تسمم الأفلاتوكسين لدى الحيوانات. يُسجَّل تسمم الأفلاتوكسين في مناطق عديدة من العالم، ويصيب الكلاب والعجول إلى جانب الدواجن النامية والخنازير الصغيرة، بحسب دليل MSD البيطري.
ما الذي يكشفه الاختبار
يبيّن دليل MSD البيطري أن الأفلاتوكسينات التي تُحلَّل في المحاصيل هي B1 وB2 وG1 وG2، وأن الحرف يدل على لون التألق تحت الأشعة فوق البنفسجية، أي الأزرق للنوعين B والأخضر للنوعين G. يُعرَف الأفلاتوكسين B1 بأنه السم الغالب في المحاصيل، وبأنه أشد المستقلبات سمّيةً وتسرطناً بحسب دليل MSD البيطري. يُعدّ الأفلاتوكسين M1 المستقلب الرئيس للأفلاتوكسين B1، وتذكر مراجعة منشورة في PMC أن وجوده في منتجات الألبان ناتج عن وجود B1 في علف الحيوان.
العينة
يُحلَّل العلف كيميائياً بحثاً عن الأفلاتوكسينات، وفق دليل MSD البيطري، أما في الحيوان فالمتاح عملياً هو تحليل M1 في الحليب وربما B1 أو M1 في الكبد. تشدد مراجعة PMC على أن أخذ العينة وتحضيرها في غاية الأهمية لتحديد الأفلاتوكسينات عند مستوياتها الدقيقة جداً. تذكر مراجعة PMC حول كشف الأفلاتوكسين M1 في منتجات الألبان أن السموم الفطرية في المنتجات الصلبة كالجبن لا تتوزع عادةً بانتظام، إذ قد تتجمع في بؤر موضعية.
مبدأ الاختبار
تصف مراجعة PMC عن كشف الأفلاتوكسين M1 في منتجات الألبان الإجراءات التحليلية بأنها تمر عادةً بمراحل هي أخذ العينة ثم الاستخلاص ثم التنقية ثم التحديد والقياس الكمي. تُستعمل أعمدة الألفة المناعية عادةً في مرحلة التنقية، وتذكر المراجعة أن الطرائق القائمة عليها أثبتت متانتها في تنقية M1 وفصله وتركيزه في الحليب ومنتجاته. يجري الكشف في الكروماتوغرافيا السائلة عادةً بمقياس التألق أو بامتصاص الأشعة فوق البنفسجية أو بمطيافية الكتلة. تذكر مراجعة PMC أن المحاليل المستعملة في الطور المعكوس تخمد تألق السموم الفطرية مثل M1، ولذلك قد يلزم اشتقاق كيميائي قبل العمود أو بعده. تذكر مراجعة PMC أن مطيافية الكتلة تُستعمل لأغراض التأكيد لأنها تنتج أطيافاً ذات أنماط تجزؤ مميزة. تعتمد طرائق كشف الأفلاتوكسين M1 في الغالب على مقايسات مناعية كيميائية للفرز، منها مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)، بينما ظهرت مؤخراً مقايسات المستشعرات الحيوية، بحسب مراجعة PMC. تُستعمل في تحليل الأفلاتوكسين عادةً مقايسات ELISA التنافسية المباشرة، وهي بسيطة لكنها تتطلب بحسب المراجعة فترات حضانة طويلة ومراحل غسل وخلط متعددة.
الاستعمالات
يقوم تشخيص تسمم الأفلاتوكسين، بحسب دليل MSD البيطري، على العلامات السريرية وآفات الكبد والكشف المخبري عن الأفلاتوكسينات في العلف أو الحليب. يصف دليل MSD البيطري الكبد بأنه العضو الرئيس المتأثر، ويذكر أن الأفلاتوكسينات تضر الطيور والكلاب والقطط والماشية والقوارض والأسماك والإنسان، وأن صغار السن أشد عرضة. يذكر دليل MSD البيطري أن لمعظم الدول حدوداً تنظيمية للأفلاتوكسينات في الأعلاف وأغذية الإنسان والحليب.
تفسير النتيجة
تصف مراجعة PMC المقايسات المناعية مثل ELISA بأنها تصلح لفرز أولي للعينات الملوثة، وتُستعمل بعدها طرائق أخرى لتأكيد النتائج. يربط دليل MSD البيطري التغيرات المخبرية في معظم الأنواع المصابة بتسمم الأفلاتوكسين بتضرر الكبد واضطراب التخثر وضعف تصنيع البروتينات. قد يسبب التعرض المزمن للأفلاتوكسين نقص بروتينات الدم، ويشمل ذلك انخفاض الألبومين والغلوبولين معاً، وفق دليل MSD البيطري.
الإطار التنظيمي
تفيد مراجعة PMC بأن الأفلاتوكسينات منظَّمة قانونياً في أكثر من 80 دولة، وأن تشريعاتها غير موحدة على المستوى الدولي. تحدد اللائحة 401/2006 الصادرة عن المفوضية الأوروبية طرائق أخذ العينات والتحليل للرقابة الرسمية على مستويات الأفلاتوكسين M1 في الحليب.