طُوّرت مقايسات الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) التنافسية لطفيليي Babesia bovis وBabesia bigemina بهدف التحقق منها لتكون اختبارات قياسية دولية، بحسب المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH). ترى المنظمة أن خصائص الاختبارين تبدو مستوفية للمعايير المطلوبة للتطبيق الدولي.
مقارنة بمقايسات ELISA الأخرى
تذكر المنظمة أن مقايسة ELISA التنافسية جرى التحقق منها على نطاق أوسع في مختبرات مختلفة، وأن مستضدها تتعرف عليه أجسام مضادة من مناطق متنوعة حول العالم. قُيّمت في الأرجنتين مقايسة ELISA تنافسية مختلفة تستخدم مستضد سطح الميروزويت المأشوب 2c (rMSA-2c) لطفيلي B. bovis، فأظهرت نوعية 98% وحساسية 96.2%.
المبدأ
تعتمد مقايسات ELISA التنافسية على حاتمة (epitope) للخلايا البائية تقع في الطرف الكربوكسيلي للبروتين المرتبط بالروبتري 1 (RAP 1)، وهي حاتمة خاصة بالنوع، محفوظة على نطاق واسع ومتكررة ترادفيًا. تثبّط الأمصال الإيجابية في مقايسة B. bovis ارتباط الجسم المضاد وحيد النسيلة BABB75A4 الخاص بالحاتمة، بينما تثبّط في مقايسة B. bigemina ارتباط الجسم المضاد وحيد النسيلة 64/04.10.3. يُجفَّف المستضد المأشوب المنقّى في آبار صفائح المعايرة الدقيقة لتسهيل التوحيد القياسي والتداول والتوزيع، وللاستخدام والمقارنة بين المختبرات في ظروف متفاوتة.
الأداء
بلغت نوعية مقايسة B. bigemina 98.3% وحساسيتها 94.7%، بافتراض معدل انتشار 25% وعتبة تثبيط للقيمة السلبية عند 16%.
اختيار العتبة
عند رفع عتبة التثبيط في مقايسة B. bigemina من 16% إلى 21% بلغت النوعية 100% وتراجعت الحساسية إلى 87.2%. تحركت القيم التنبؤية لمقايسة B. bigemina مع عتبة 21% في اتجاهين متعاكسين: صعدت الإيجابية من 94.9% إلى 100%، وهبطت السلبية عند انتشار 25% من 98.2% إلى 95.9%.