الكيمياء النسيجية المناعية (immunohistochemistry) طريقة يذكر فصل الإسهال الفيروسي البقري في دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أنها استُعملت في بعض البلدان للتعرف على فيروس الإسهال الفيروسي البقري. يعدّ ملحق في دليل WOAH يعرض آراء الخبراء من مزايا الكيمياء النسيجية المناعية لفيروس الإسهال الفيروسي البقري أنها تتيح رؤية المكوّنات الفيروسية في الآفات وتقييم توزّعها في الأنسجة.
ما الذي يكشفه الاختبار
ينتمي فيروس الإسهال الفيروسي البقري، وفق دليل WOAH، إلى جنس Pestivirus ضمن فصيلة Flaviviridae، وجينومه حمض نووي ريبي خطي مفرد السلسلة وموجب الاتجاه. يقدّر دليل WOAH نسبة الأبقار المصابة إصابة مستديمة بفيروس الإسهال الفيروسي البقري بنحو 1-2% في تجمّعات الأبقار التي تخلو من برنامج صارم لمكافحة الفيروس، ويذكر أن الحيوانات الناجية من عدوى فيروس الإسهال الفيروسي البقري داخل الرحم خلال الثلث الأول من الحمل تصبح مصابة إصابة مستديمة في كل الحالات تقريباً. يذكر دليل WOAH أن المرض المخاطي لا ينشأ إلا في الحيوانات المصابة إصابة مستديمة بفيروس الإسهال الفيروسي البقري. ينبّه دليل WOAH إلى أن نفوق حيوان مصاب إصابة مستديمة بفيروس الإسهال الفيروسي البقري لا يترك آفات مميزة للفيروس، وأن الصورة المرضية كثيراً ما تتعقد بعدوى ثانوية بعوامل أخرى.
العينة
يذكر دليل WOAH، في حديثه عن التعرف على فيروس الإسهال الفيروسي البقري بالكيمياء النسيجية المناعية، أن أي نسيج تقريباً يمكن استعماله لدى الأبقار المصابة إصابة مستديمة، مع نجاح جيد خاصةً في العقد اللمفية والغدة الدرقية والجلد والدماغ والمنفحة والمشيمة. يعدّ دليل WOAH قطع الأذن وغيرها من خزعات الجلد عينات أثبتت فائدتها في كشف العدوى المستديمة بفيروس الإسهال الفيروسي البقري والحيوان حيّ، ويذكر أن الجلد هو ما جُمع من الحيوانات الحية في حين تصلح أنسجة كثيرة متنوعة من الحيوانات النافقة. يدعو دليل WOAH إلى الحذر في إعادة فحص عينات الجلد، لأن مستضد فيروس الإسهال الفيروسي البقري ثبت أنه قد يبقى في الجلد أسابيع كثيرة في بعض الحالات الحادة.
مبدأ الاختبار
يشدد دليل WOAH على أهمية التحقق الكامل من صلاحية الكواشف والإجراءات المستعملة في الكيمياء النسيجية المناعية لفيروس الإسهال الفيروسي البقري، وعلى إزالة التفاعلية غير النوعية. يصف ملحق آراء الخبراء في دليل WOAH الكيمياء النسيجية المناعية لفيروس الإسهال الفيروسي البقري بأنها متطلبة تقنياً، وبأن الكواشف المتاحة لكشف المستضد في الأنسجة المثبتة بالفورمالين محدودة. يذكر دليل WOAH أن الكيمياء النسيجية المناعية وعزل الفيروس كليهما كثيفا العمل ومكلفان وقد يكونان متطلبين تقنياً في كشف فيروس الإسهال الفيروسي البقري.
الاستعمالات
يعدّ دليل WOAH التعرف على الأبقار المصابة إصابة مستديمة بفيروس الإسهال الفيروسي البقري عنصراً أساسياً في مكافحة العدوى، ويذكر أن هذه الحيوانات يسهل التعرف عليها بطرق متنوعة تكشف المستضدات الفيروسية أو الحمض النووي الريبي الفيروسي مباشرة في الدم والأنسجة. يروي دليل WOAH أن الكشف عن الحيوانات المصابة إصابة مستديمة بفيروس الإسهال الفيروسي البقري اعتمد في الماضي اعتماداً كبيراً على عزل الفيروس في المزارع الخلوية، ويذكر أن عزل الفيروس مستعمل أيضاً لكشف النمط غير المُحدث لاعتلال الخلايا من فيروس الإسهال الفيروسي البقري في الدم. يذكر دليل WOAH أن طرق الوسم الإنزيمي مفيدة في كشف مستضد فيروس الإسهال الفيروسي البقري في المقاطع النسيجية. يستشهد دليل WOAH بدراسة قارنت الكيمياء النسيجية المناعية على قطع الأذن بمقايسة ELISA لالتقاط المستضد على قطع الأذن وبعزل الفيروس من الطبقة البيضاء، في كشف العجول المصابة إصابة مستديمة بفيروس الإسهال الفيروسي البقري.
مكانه في المعايير الدولية
يرى دليل WOAH أن مقايسات الوسم الإنزيمي لمستضد فيروس الإسهال الفيروسي البقري في المقاطع النسيجية غير مناسبة لإصدار شهادات الحيوانات في التجارة الدولية، وأنه ينبغي أن يقتصر استعمالها على التحريات التشخيصية. يُلزم دليل WOAH كل طريقة تقوم على ارتباط الأضداد، كمقايسة ELISA والكيمياء النسيجية المناعية، بأن يُبرهَن على أنها تلتقط فيروسات الإسهال الفيروسي البقري بكل ما بينها من تنوع مستضدي وجيني. يشترط دليل WOAH التحقق المكثف من صلاحية جميع طرق فحص فيروس الإسهال الفيروسي البقري على مجموعات معروفة من الأبقار غير المصابة والمصابة، بما فيها حيوانات ذات تفيرس دم منخفض العيار وأخرى عالي العيار. يضع جدول طرق التشخيص في فصل الإسهال الفيروسي البقري من دليل WOAH أربع درجات لملاءمة كل طريقة لكل غرض، تتدرج من «موصى بها» و«موصى بها مع قيود» إلى «مناسبة في ظروف محدودة جداً» و«غير مناسبة».