عزل Ehrlichia ruminantium بالزرع في المختبر (In-vitro culture)

multiple species1 مصادر موثّقة

يهدف زرع Ehrlichia ruminantium في المختبر إلى عزل العامل المسبب لمرض الماء القلبي (heartwater) من دم الحيوانات المتفاعلة، وذلك بتنميته على خلايا بطانية مأخوذة من المجترات. تشجع المنظمة العالمية لصحة الحيوان على عزل E. ruminantium لتنميط السلالات الموجودة في منطقة ما لأغراض برامج التحصين.

مقارنة بالاختبارات الأخرى

لا تعدّ المنظمة العالمية لصحة الحيوان العزل اختبار الخيار الأول للتشخيص السريع لمرض الماء القلبي لأنه يستهلك جهداً ووقتاً كبيرين، رغم أن خطوطاً خلوية عديدة ثبت أنها تدعم نمو البكتيريا. ترى المنظمة أن الأدوات الجزيئية هي أفضل وسائل تشخيص المرض، إذ إن E. ruminantium بكتيريا إجبارية التطفل داخل الخلايا لا تنمو في الأوساط اللاخلوية، وعزلها معقد ويستغرق عدة أسابيع. تصعب رؤية E. ruminantium في لطاخة الدم، بينما يسهل عزلها بالزرع من الدم أو البلازما خلال التفاعل الحموي.

الخلايا المستخدمة في الزرع

تُستمد الخلايا البطانية المستعملة غالباً في العزل من الحبل السري أو الأبهر أو الشريان الرئوي لدى الأبقار والماعز والأغنام، مع وصف أنماط بطانية أخرى للزرع الروتيني. لم يُعتمد حتى الآن خط خلوي قياسي لعزل E. ruminantium.

خطوات الزرع وقراءة النتيجة

تُفحص الطبقة الخلوية الأحادية بانتظام بحثاً عن لويحات صغيرة من التحلل الخلوي، وتظهر اللويحات الأولى عادة بعد نحو أسبوعين. يُستعان بصبغ الطبقة الخلوية بجيمزا أو RAL555 أو بالتألق المناعي لتأكيد وجود توتات (morulae) E. ruminantium المميزة متى ظهرت لويحات التحلل الخلوي، في حين يُجرى التمرير إلى طبقات خلوية غير مصابة حين يبلغ التحلل 80% من الطبقة.

تصنيف الفحص

طريقة الفحص
زرع

الحالات التي تُشخَّص به

1

المصادر

  1. WOAH Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, ch. 3.1.9 HeartwaterWOAH ©: test names and purpose grades only (facts); no WOAH prose