تكشف مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) للمتفطرة المسببة لداء نظير السل (Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis ELISA) الأجسام المضادة في المصل ضد Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis، وهي بحسب بحث نشرته مجلة Journal of Veterinary Diagnostic Investigation عام 2024 مسبب داء نظير السل، أو داء جونز، وهو مرض يصيب أمعاء المجترات ويتصف بالإزمان والعدوى وتعذّر الشفاء. يصف فصل داء نظير السل (داء جونز) في دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) لحيوانات اليابسة مقايسة ELISA بأنها في الوقت الحاضر أكثر الاختبارات حساسية ونوعية لكشف الأجسام المضادة في المصل ضد Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis في الأبقار.
ما الذي يكشفه الاختبار
تُعدّ مقايسة ELISA الممتصة، بحسب فصل داء نظير السل في دليل WOAH، الصيغة المصلية المعتادة لتشخيص داء نظير السل في الأبقار. يذكر فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن الأجسام المضادة في المصل قد توجد أيضاً لدى الحيوانات التي تعافت من العدوى.
مبدأ الاختبار
يذكر فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن مقايسة ELISA الممتصة تجمع بين حساسية مقايسة ELISA والنوعية الإضافية التي تمنحها خطوة الامتصاص. يوضح فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن الأمصال تُخفَّف قبل فحصها بمقايسة ELISA غير المباشرة في محلول منظِّم يحتوي مستضد M. phlei الذائب، وأن هذا الإجراء يزيل الأجسام المضادة غير النوعية المتصالبة ويرفع نوعية المقايسة. يصف فصل داء نظير السل في دليل WOAH صيغة تُغطّى فيها آبار صفائح المعايرة الدقيقة بمستضد Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis، فتكوّن الأجسام المضادة النوعية لهذه الجرثومة في العينة المخففة معقداً مع المستضد المثبت عند حضن العينة في البئر. يتعرّف غلوبولين مناعي مضاد للغلوبولين البقري، موسوم ببيروكسيداز الفجل الحار، على الغلوبولينات المناعية المرتبطة بمستضد الطور الصلب في مقايسة ELISA، بحسب فصل داء نظير السل في دليل WOAH. يذكر فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن اللون الناتج في مقايسة ELISA، المقيس بالمطياف الضوئي، يتناسب مع كمية الأجسام المضادة الموجودة في العينة المفحوصة.
تفسير النتيجة
يذكر فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن حساسية مقايسة ELISA تماثل حساسية اختبار تثبيت المتممة (CFT) في الحالات السريرية، وتفوقها في الحاملات المصابة إصابة تحت سريرية. ينقل فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن مقايسة ELISA تكشف نحو 30% إلى 40% من الأبقار التي يحددها زرع البراز على الأوساط الصلبة مصابة. يذكر فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن حساسية مقايسة ELISA، كما في طرق الزرع، تتوقف على مستوى طرح Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis في البراز وعلى عمر الحيوانات. ينقل فصل داء نظير السل في دليل WOAH عن دراسة كبيرة في أستراليا أن الحساسية الفعلية لمقايسة ELISA بلغت 1.2% و8.9% و11.6% في الأبقار بعمر سنتين وثلاث وأربع سنوات على الترتيب، وبقيت بين 20% و30% في الفئات الأكبر سناً. تمتد حساسية مقايسة ELISA في الأبقار من 7% إلى 94% ونوعيتها من 40% إلى 100%، في أرقام ينقلها فصل داء نظير السل في دليل WOAH عن مراجعة علمية. ينبّه فصل داء نظير السل في دليل WOAH إلى أن الحساسية والنوعية تُحسبان في الغالب قياساً إلى نتائج زرع البراز، مع أن حساسية زرع البراز مجهولة في الأبقار المصابة إصابة تحت سريرية. ينقل فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن مقايسة ELISA متاحة تجارياً أظهرت في المجترات الصغيرة نوعية بين 98.2% و99.5% (فترة ثقة 95%)، وكشفت 35% إلى 54% من الحيوانات التي ثبتت إصابتها نسيجياً. في المجترات الصغيرة يورد فصل داء نظير السل في دليل WOAH، نقلاً عن مراجعة علمية، مدى لحساسية مقايسة ELISA من 16% إلى 100% ولنوعيتها من 79% إلى 100%. يذكر فصل داء نظير السل في دليل WOAH أنه أُفيد بأن اختبار الانتشار المناعي في هلام الآجار يعطي في المجترات الصغيرة في نيوزيلندا وأستراليا حساسية ونوعية أعلى قليلاً مما تعطيه مقايسات ELISA. يذكر فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن أمراضاً وعداوى متفطرية أخرى، منها السل في الثدييات والطيور، تحفّز ظهور أجسام مضادة في المصل. تؤدي لقاحات الخلية الكاملة ضد داء نظير السل، بحسب فصل داء نظير السل في دليل WOAH، إلى ظهور أجسام مضادة في مصل الحيوانات المحصّنة. يرى فصل داء نظير السل في دليل WOAH أنه إذا لزم تشخيص العدوى في الحيوانات المحصّنة فيُستحسن استعمال اختبارات تكشف مستضد Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis في عينات البراز أو الأنسجة.
مكانه في المعايير الدولية
يمنح جدول طرق التشخيص في فصل داء نظير السل في دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) مقايسة ELISA العلامة +++، أي «موصى بها لهذا الغرض»، في خمسة من الأغراض الستة التي يقيّمها، والعلامة +، أي «مناسبة في ظروف محدودة جداً»، في غرض واحد. يذكر فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن اختبار تثبيت المتممة واختبار الانتشار المناعي في هلام الآجار أضعف حساسية ونوعية، وأنهما لم يعودا موصى بهما في الأبقار. يذكر فصل داء نظير السل في دليل WOAH أن عدة أطقم تجارية لمقايسة ELISA الممتصة متاحة، وأن طريقة الإجراء ومواده وتفسير النتائج والحسابات موصوفة كاملة في التعليمات المرفقة بالطقم التجاري. لا يتوفر مصل مرجعي دولي، كما يقرّ فصل داء نظير السل في دليل WOAH.