اختبار تثبيط النمو (growth inhibition test) يعتمد على تثبيط مباشر لنمو الميكوبلازما على وسط صلب بمصل مفرط المناعة نوعي، ويكشف في الأساس المستضدات السطحية للكائن المعزول. يفيد فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) بأن ذات الجنب والرئة المعدية عند الماعز مرض يطال الماعز وبعض المجترات البرية ويسببه Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae، وبأنها ليست عدوى حيوانية المنشأ.
ما الذي يكشفه الاختبار
يصف فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) اختبار تثبيط النمو بأنه أبسط الاختبارات المتاحة وأكثرها نوعية. ترى مراجعة شاملة نشرها يتوكو وزملاؤه عام 2019 أن اختبار تثبيط النمو مفيد خصوصاً في التعرف على المسبب لأن العزلات متجانسة مصلياً وتنتج مناطق تثبيط واسعة.
مبدأ الاختبار
تصف مراجعة يتوكو وزملائه اختبار تثبيط النمو بأنه يستعمل مصلاً مفرط المناعة نوعياً لتثبيط نمو الميكوبلازما على أوساط الآجار الصلبة. يذكر فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أن اختبار تثبيط النمو يستعمل مزرعة مرقية في الطور اللوغاريتمي المتوسط إلى المتأخر بثلاثة تخفيفات عشرية، يرتبط اختيارها بقوة نمو المعزولة على الآجار. يذكر فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أن الصفائح تُحضَّن في اختبار تثبيط النمو عند 37 درجة مئوية من يومين إلى ستة أيام. يذكر فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أن مستضدات الميكوبلازما المستعملة في إنتاج المصل مفرط المناعة كثيراً ما تتلوث بمكونات الوسط.
الاستعمالات
تسبق ثلاث تمريرات، مع استنساخ مفضَّل، محاولة تعريف السلالة البرية من Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae بحسب فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH). ينبغي بحسب فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أن تُؤكَّد هوية الكائنات المعزولة بطرائق جزيئية أو كيميائية حيوية أو مناعية. يقوم تشخيص ذات الجنب والرئة المعدية عند الماعز على الملاحظات السريرية والتشريحية بعد الموت، ويُفترض أن تؤكده فحوص مخبرية، بحسب فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH). تعدّ دراسة عن الكشف السريري والمصلي الجزيئي عن Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae في ماعز جنوب باكستان اختبار تثبيط النمو من الاختبارات المصلية الشائعة، إلى جانب التراص الدموي غير المباشر أو المنفعل والممتز المناعي المرتبط بالإنزيم وتثبيت المتممة والتراص باللاتكس والأجسام المضادة المتألقة.
تفسير النتيجة
يذكر فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) في وصف اختبار تثبيط النمو أن تثبيط الديجيتونين يكون في العادة واضحاً، وأن تثبيط المصل المضاد قد يصعب تفسيره وقد يصحبه تثبيط جزئي للنمو لا كامل، بحسب نوع الميكوبلازما وكثافة المستعمرات وفاعلية المصل. تتفاعل Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae تفاعلاً متصالباً في اختبار تثبيط النمو مع ثلاثة أنواع هي Mycoplasma leachii وMycoplasma equigenitalium وMycoplasma primatum إذا استُعملت أمصال متعددة النسائل، بينما أُنتج جسم مضاد نوعي لها لاستعماله في الاختبار، بحسب فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH). يذكر فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أن نسبة صغيرة من معزولات Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae تتفاعل أيضاً في اختبار تثبيط النمو مع مصل مضاد لنوع آخر من الميكوبلازما. يذكر فصل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أن نتائج اختبار تثبيط النمو ينبغي تفسيرها بعناية لأن بعض سلالات الأبقار عُرِّفت خطأً بالاختبار باستعمال المصل المضاد «النوعي». تذكر مراجعة يتوكو وزملائه أن اختبار تثبيط النمو يُعدّ أبسط الاختبارات وأكثرها نوعية، لكن حساسيته المنخفضة تجعله أقل موثوقية. تذكر مراجعة يتوكو وزملائه أن التفاعلات المتصالبة بين Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae وMycoplasma capricolum subsp. capricolum قد تحدث رغم استعمال جسم مضاد وحيد النسيلة لمنعها. تذكر مراجعة يتوكو وزملائه أن التشابه الوراثي بين الميكوبلازمات يجعل اختبار تثبيط النمو أقل حسماً. تذكر دراسة سوايفان وزملائه أن أفراد عنقود Mycoplasma mycoides يتشابهون وراثياً ومناعياً تشابهاً شديداً أدى إلى صعوبات في التشخيص التفريقي.