عزل فيروس إنفلونزا الطيور في أجنة البيض

birds (Aves)1 cited sources

تعدّ المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) عزل الفيروس (virus isolation) الطريقةَ المرجعية في تشخيص إنفلونزا الطيور (avian influenza, AI)، وتخصّه أساسًا بتشخيص أول حالة سريرية في الفاشية. يوفّر العزل عزلات فيروسية تُحال إلى تحليلات مختبرية إضافية، ويُجرى بحقن بيض دجاج مُجنَّن خالٍ من مسببات أمراض محددة (SPF) أو خالٍ من أجسام مضادة محددة (SAN)، وهي طريقة الإنماء المفضلة لفيروسات الإنفلونزا A.

العينة

توصي WOAH بأن تشمل عينات العزل من الطيور الحية مسحات فموية بلعومية أو رُغامية ومسحات مذرقية مغطاة بالبراز بشكل ظاهر، وأن تشمل عينات الطيور النافقة محتويات الأمعاء (البراز) أو مسحات مذرقية إلى جانب مسحات فموية بلعومية أو رُغامية.

الإنماء في البيض

تُحضن البيضات المحقونة عند 37°م (بمدى يتراوح بين 35 و39°م) مدةً تتراوح بين يومين وسبعة أيام. توصي WOAH بتمرير السوائل التي تعطي تفاعلًا سلبيًا إلى دفعة أخرى من البيض على الأقل، على ألا تتجاوز التمريرات ثلاثًا.

تفسير النتيجة

يرجّح نشاط التراص الدموي (HA) وجود أحد فيروسين، هما فيروس الإنفلونزا A أو فيروس Avian orthoavulavirus (المعروف سابقًا بالفيروس المخاطاني الطيري)، شرط أن تكون السوائل السلوية السقائية خالية من البكتيريا بتحقق ميكروبيولوجي.

مقارنة بالاختبارات الأخرى

في التشخيص الأولي لإنفلونزا الطيور، صار الكشف المباشر في العينات عن قطعة أو أكثر من جينوم فيروس الإنفلونزا A، بتفاعل النسخ العكسي والبوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي (real-time RT-PCR) أو بتقنيات جزيئية أخرى مصادق عليها، هو ما حلّ إلى حد كبير محلّ العزل في الأجنة. تصف WOAH الطرق التقليدية بأنها مكلفة وكثيفة الجهد وبطيئة، وتذكر أنها قد تكون بالغة القيمة في إثبات وجود فيروس معدٍ أو نفيه حين تأتي نتائج الاختبارات الأخرى كلها، ومنها RT-PCR التقليدي وreal-time RT-PCR، إيجابيةً ضعيفة.

السلامة الحيوية

توصي WOAH بالتعامل مع فيروسات إنفلونزا الطيور وفق التدابير الملائمة الواردة في الفصل 1.1.4 من دليلها، وهو المعيار الخاص بالسلامة الحيوية والأمن الحيوي وإدارة المخاطر البيولوجية في المختبرات البيطرية ومرافق الحيوان.

How this test is classified