إظهار محفظة عصيات الجمرة الخبيثة (تفاعل مَكفادين)

إظهار المحفظة فحص مجهري للكشف السريع عن الجمرة الخبيثة (anthrax)، تُرى فيه عصيات Bacillus anthracis المحفظة في لطاخة دم مصبوغة بصبغة الأزور ب (azure B) أو بأزرق الميثيلين متعدد الألوان (polychrome methylene blue)، ويُعرف بتفاعل مَكفادين (M'Fadyean's reaction). النتيجة الإيجابية في هذا الفحص حاسمة، إذ تعدّ المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) رؤية العصيات المحفظة في اللطاخة تشخيصية بالكامل.

العينة

تكفي قطرات صغيرة من الدم أو سائل النسيج، وأفضل اللطاخات ما كان رقيقًا وصغيرًا. تؤخذ اللطاخات من دم وريد الأذن أو الأوردة الطرفية الأخرى، أو من الإفرازات عند الفتحات الطبيعية، وفي الخيل والخنازير من سائل الوذمة أو العقد اللمفية السطحية في منطقة الرقبة.

المبدأ

تصطبغ المحفظة باللون الوردي بينما تصطبغ خلايا العصية بالأزرق الداكن، في حين لا تكشف صبغة غرام (Gram stain) المحفظة أصلًا. ويوصي دليل WOAH بتثبيت اللطاخات بالإيثانول أو الميثانول لا بالحرارة، وبترك الصبغة خمس دقائق قبل غسلها للحصول على أفضل نتيجة. للمختبرات التي تحتاج صبغة مَكفادين موثوقة للكشف السريع، توصي WOAH باستعمال صبغة الأزور ب النقية تجاريًا.

تفسير النتيجة وحدوده

إذا مضى على نفوق الحيوان أكثر من 24 ساعة فقد يصعب رصد المحفظة. ويوصي دليل WOAH، منعًا لتلوث المختبر، بتعقيم الشريحة وورق التنشيف بالموصدة (autoclave) أو بتركهما بضع ساعات في محلول هيبوكلوريت الصوديوم بتركيز 10%.

مقارنة بالاختبارات الأخرى

في دراسة أجراها أمينو وزملاؤه (Aminu et al., 2020) على عينات دم محضَّرة ميدانيًا، جاءت الحساسية والنوعية الوسيطتان للفحص المجهري بصبغة الأزور ب مماثلتين لنظيرتيهما مع أزرق الميثيلين متعدد الألوان، الذي تصفه الدراسة بالمعيار الموصى به. وتذكر المنظمة أن المحفظة، مع مستضدات الذيفان، هي المستضدات غير المشتركة الوحيدة التي تسمح بتمييز B. anthracis من Bacillus cereus بالطرق المناعية.