تبني المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) تأكيد تشخيص الرعام (glanders) على عزل Burkholderia mallei والتعرف عليها في عينة من أحد الخيليات أو من منتج مشتق منه، أو على التعرف في هذه العينات على مستضد أو مادة وراثية خاصة بها. تفضّل WOAH محاولة العزل بالزرع (culture) من آفات مغلقة غير ملوثة.
ظروف الزرع
تنمو B. mallei هوائيًا على النحو الأمثل عند 37°م، ولا تصبح لاهوائية اختيارية إلا بوجود النترات. توصي WOAH بحضن المزارع 72 ساعة، وتعدّ الإغناء بالغليسرول مفيدًا بشكل خاص.
صعوبات العزل
تطغى بكتيريا أخرى كثيرًا على B. mallei حتى في العينات الطازجة المأخوذة في ظروف معقمة، ما يجعل عزلها بالغ الصعوبة. ترى WOAH أن الملاحظة الدقيقة لازمة بعد 72 ساعة من الحضن حتى لا تُغفل مستعمرات B. mallei الصغيرة الرمادية اللامعة على آغار دم الأغنام.
عزل B. pseudomallei من عينات الخيل
لا توجد إجراءات مصادق عليها لعزل B. pseudomallei من عينات الخيل.
تحديد الهوية
تفتقر B. mallei إلى الأسواط فلا تتحرك، خلافًا لبقية كائنات مجموعة Pseudomonas وقريبتها B. pseudomallei. تعدّ WOAH عدم الحركة أهم خاصية ظاهرية في التشخيص، وتشترط إثباتها متى توفرت مزرعة نقية.
مقارنة بالاختبارات الأخرى
يُؤكَّد تحديد هوية العزلات المشتبه فيها بالتفاعلات الكيميائية الحيوية أو بتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، في حين تفتقر مجموعات التعرف الكيميائية الحيوية التجارية إلى الحساسية التشخيصية.
السلامة الحيوية
تشترط WOAH التعامل مع كل مادة مصابة أو ملوثة، أو يُحتمل أن تكون كذلك، في مختبر مزوَّد بضوابط سلامة وأمن حيويين ملائمة بعد تحليل للمخاطر الحيوية، لأن B. mallei وB. pseudomallei قد تنتقلان إلى الإنسان.