تذكر مراجعة Ramirez وزملائه (2013) في مجلة Viruses عن الفيروسات العدسية للمجترات الصغيرة، في سياق التهاب المفاصل والدماغ الفيروسي في الماعز ومرض المادي-فيسنا، أن طرائق الكيمياء المناعية النسيجية التي تكشف مستضدات الفيروس البروتينية بأجسام مضادة نوعية في العينات النسيجية والمسحات وتحضيرات الطرد الخلوي مفيدة في البحث والدراسات التأكيدية. تذكر مراجعة Ramirez وزملائه أن الكيمياء المناعية النسيجية لا تُطبَّق عادةً في التشخيص التفريقي الروتيني على الحيوانات الحية.
ما الذي يكشفه الاختبار
يذكر دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) للحيوانات البرية (طبعة 2018) أن التهاب المفاصل والدماغ الفيروسي في الماعز ومرض المادي-فيسنا يتميزان بثبات العامل المسبب مدى الحياة في وحيدات النوى والبلاعم لدى العائل، وبمدة متفاوتة بين العدوى وظهور استجابة أجسام مضادة قابلة للكشف مصلياً. يذكر كتاب الأمراض المعدية للماشية (Infectious Diseases of Livestock) على منصة Anipedia بجامعة بريتوريا أن الخلايا المستهدفة الرئيسية لفيروس المادي-فيسنا هي وحيدات النوى والبلاعم، مع أن خلايا متنوعة تسمح بالعدوى. يذكر كتاب Anipedia في فصل المادي-فيسنا أن من الصعب تحديد ما إذا كان كشف مستضد الفيروس أو حمضه النووي يدل على إصابة وحيدات النوى والبلاعم وغيرها من الخلايا أم على امتصاصها نواتج الفيروس.
العينة
يذكر دليل WOAH أن الأنسجة المهمة للفحص بعد التشريح هي الرئة لالتهاب الرئة الخلالي المتقدم، والدماغ والنخاع الشوكي لالتهاب السحايا والدماغ، والضرع لالتهاب الضرع المتصلب، والمفاصل المصابة والزليل لالتهاب المفاصل، والكلية لالتهاب الأوعية. يذكر دليل WOAH أن الاستجابة الالتهابية في كل موضع متشابهة وتتألف من تفاعل خلالي وحيد النوى، تصحبه أحياناً تجمعات كبيرة من الخلايا اللمفاوية وتكوّن بصيلات.
مبدأ الاختبار
يذكر دليل WOAH أن دليل وجود مستضد الفيروس يُلتمس بالوسم المناعي، وعادةً بالأجسام المضادة غير المباشرة المتألقة أو بطرائق البيروكسيداز المناعية غير المباشرة. يذكر دليل WOAH أن وجود فيروس المادي-فيسنا أو فيروس التهاب المفاصل والدماغ في الماعز يمكن تأكيده بطرائق الوسم المناعي وبالمجهر الإلكتروني. يذكر دليل WOAH أن خلايا الطبقات الأحادية المشتبه بها تُرسَّب بالنبذ وتُحضَّر منها عينات لتحديد جسيمات الفيروس العدسي المميزة بالمجهر الإلكتروني النافذ، وأن وجود الناسخ العكسي في سائل مزرعة الخلايا يدل على وجود فيروسات قهقرية. يذكر كتاب Anipedia في فصل المادي-فيسنا أن الفيروس يمكن كشفه بفحص الناسخ العكسي أو بالمجهر الإلكتروني أو بتقنيات الوسم المناعي، وأن كشف الحمض النووي الريبي في الخلايا المزروعة ممكن بتفاعل البوليميراز المتسلسل بالناسخ العكسي أو بالتهجين الموضعي بحمض نووي موسوم، ويمكن الجمع بينه وبين الكيمياء المناعية النسيجية لإثبات المستضدات.
الاستعمالات
يذكر دليل WOAH أن عزل فيروس المادي-فيسنا أو فيروس التهاب المفاصل والدماغ في الماعز وتوصيفه لا يُحاول عادةً لأغراض التشخيص الروتيني، وأنه إذا اشتُبه في تأثير خلوي مرضي ينبغي إجراء اختبارات كشف مستضد الفيروس. يذكر دليل WOAH أن العزل بعد التشريح يتحقق بسهولة أكبر بإنشاء مزارع قطع من الأنسجة المصابة كالرئة والضفيرة المشيمية والغشاء الزليلي والضرع، وأنه يمكن محاولته في حالات سريرية أو تحت سريرية حية بمزج الكريات البيضاء من الدم أو الحليب مع مزارع خلايا غنمية أو ماعزية مناسبة.
تفسير النتيجة
يذكر دليل WOAH أن عزل فيروس المادي-فيسنا أو فيروس التهاب المفاصل والدماغ في الماعز نوعي جداً لكن حساسيته متفاوتة. تذكر مراجعة Ramirez وزملائه أن العزل طريقة مجهدة جداً قد يعيق أداءَها نقصُ الخطوط الخلوية المستجيبة وضعف إنتاج الفيروس في الخلايا المزروعة، وأن عزل الفيروس من كريات الدم البيضاء للحيوانات المصابة كثيراً ما يفشل، فالنتيجة السلبية ليست موثوقة دائماً. يذكر كتاب Anipedia في فصل المادي-فيسنا أن العزل يقدم دليلاً داعماً، لكن النتيجة الإيجابية قد تدل فقط على عدوى تحت سريرية لأن العدوى مستمرة. يذكر كتاب Anipedia أن تأكيد المرض بالفحص النسيجي المرضي قد يلزم لأن العلامات السريرية غير نوعية وقد يحدث المرض السريري في غياب الأجسام المضادة. تذكر مراجعة Ramirez وزملائه أنه لا يمكن حتى الآن اقتراح اختبار أو تقنية واحدة معياراً ذهبياً لتحديد حالة العدوى لدى الحيوان. يذكر كتاب Anipedia أن حساسية التشخيص بالكيمياء المناعية النسيجية لفيروس المادي-فيسنا ونوعيته تتحسنان كثيراً باستعمال مجموعة من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة الموجهة إلى بروتينات الغلاف والقلب.