تفاعل البوليميراز المتسلسل بالنسخ العكسي (RT-PCR) في الوقت الحقيقي لفيروس حمى القرم-الكونغو النزفية

multiple species1 cited sources

تَعُدّ المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) المقايساتِ الجزيئية، ومنها تفاعل البوليميراز المتسلسل بالنسخ العكسي (RT-PCR)، أداةَ الخط الأول في تشخيص حمى القرم-الكونغو النزفية (Crimean-Congo haemorrhagic fever, CCHF) وسائر الحمّيات النزفية الفيروسية. يُستخدم تفاعل RT-PCR، بحسب WOAH، في غربلة مجموعات القراد ضمن دراسات الترصد.

ما الذي يكشفه

يستهدف تفاعل RT-PCR الحمضَ النووي الريبي (RNA) لفيروس حمى القرم-الكونغو النزفية (CCHFV)، وهو فيروس صُنّف سابقًا، استنادًا إلى منشئه الجغرافي وتحليل تطور القطعة الجينية S، في تسعة فروع جغرافية: أربعة ينتشر معظمها في أفريقيا، وثلاثة في أوروبا، واثنان في آسيا.

التفيُّر الدموي لدى الحيوانات

تُحدث عدوى الفيروس لدى الفقاريات الأليفة والبرية حمى خفيفة فقط، مع تفيُّر دموي (viraemia) قابل للكشف يمتد حتى أسبوعين.

العينة

تذكر WOAH الدمَ والكبد ضمن العينات التي تُرسل إلى المختبر لتأكيد الإصابة بحمى القرم-الكونغو النزفية.

الأداء وحدوده

بلغت حساسية بعض مقايسات RT-PCR حدَّ كشف كميات لا تتعدى 10 نسخ من RNA الفيروسي في المليلتر الواحد من البلازما. تشير WOAH إلى أن التنوع الجيني للفيروس قد يجعل تصميم بادئات (primers) أو مسابر (probes) تكشف جميع السلالات المنتشرة أمرًا صعبًا، رغم أن تفاعل RT-PCR طريقة تشخيص حساسة. ترى WOAH ضرورة الجمع بين مقايستين جزيئيتين على الأقل لضمان كشف الفروع المختلفة للفيروس.

مقارنة بعزل الفيروس في زراعة الخلايا

تمتاز المقايسات الجزيئية بسرعتها مقارنةً بزراعة الفيروس، وكثيرًا ما تسمح بإصدار تشخيص مبدئي (presumptive) خلال ساعات قليلة من استلام العينة.

السلامة الحيوية

توصي WOAH بإجراء العمل على فيروس حمى القرم-الكونغو النزفية في مرافق سلامة حيوية ملائمة، بسبب خطر العدوى المكتسبة في المختبر.

How this test is classified