عزل الليشمانيا في المزرعة

يهدف عزل Leishmania في المزرعة (isolation in culture) إلى تنمية الأشكال السوطية الحية (promastigotes) لطفيلي داء الليشمانيات (leishmaniosis; Leishmania spp.)، وهو نمو لا يُعزى إلا إلى جنس Leishmania في العينات المأخوذة من المناطق الموبوءة في العالم القديم. يُلجأ إلى العزل في المزرعة عندما تكون العدوى منخفضة الدرجة، إذ لا يمكن حينها كشف الطفيليات إلا بمحاولة العزل في المختبر أو بتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR).

العينة

توصي المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) بإجراء الدراسة الطفيلية على رشافة العقدة اللمفية ورشافة نقي العظم وكشاطات الجلد والخزعات، ويمكن في داء الليشمانيات الحشوي (visceral leishmaniosis, VL) استخدام الدم أيضًا عبر أخذ الطبقة الشهباء (buffy coat)، لكن بحساسية أقل.

وسط الزرع

لا يوجد حتى الآن وسط زرع شامل تنمو فيه جميع أنواع Leishmania بسهولة، ويكاد يستحيل التنبؤ بالوسط الأنسب لعزلة بعينها. ترى المنظمة العالمية لصحة الحيوان أن على كل مختبر أن يجد الوسط الأنسب بين أوساط آغار الدم ثنائية الطور وأوساط زراعة الأنسجة المدعمة بمصل العجل الجنيني.

حدود الاختبار

يعيب العزل في المزرعة أنه يتطلب وقت تنفيذ طويلًا، ولا يُجرى إلا في مختبرات متخصصة. قد يصعب جدًا استزراع الطفيليات المأخوذة من مرضى داء الليشمانيات الجلدي المزمن (cutaneous leishmaniosis, CL) والجلدي المخاطي (mucocutaneous leishmaniosis, MCL)، وقد تموت الطفيليات أحيانًا عند الزرع الفرعي حتى بعد نجاح العزل الأولي.

العزل في المزرعة والتوصيف بالإنزيمات المتماثلة

يتطلب التوصيف بالإنزيمات المتماثلة (isoenzyme characterisation)، وهو الطريقة المرجعية لتحديد النوع، استزراع عدد كبير من الطفيليات (5 × 10⁹–1 × 10¹⁰).