ما الذي يكشفه
يكشف الزرع الجرثومي (bacteriological culture) العدوى باستعادة المتفطرات من عينات الأنسجة وعزل أفراد معقّد المتفطرة السلية منها. يمكن للزرع أن يعزل أفراد المعقّد حتى من آفات قد لا تظهر في مقاطعها النسيجية أي كائنات صامدة للحمض، إذ كثيرًا ما تكون الآفات قليلة العصيات (paucibacillary)، وتتفاوت حمولتها الجرثومية فمنها الغني بالجراثيم ومنها الفقير بها.
عوامل نجاح الزرع
يتوقف نجاح الزرع في استعادة المتفطرات على عوامل تمتد من المسلخ إلى المختبر:
- أسلوب أخذ العينات في المسلخ ونوع الأنسجة التي تُجمع؛
- حفظ العينات خلال نقلها إلى المختبر بالتبريد أو التجميد؛
- خطوة إزالة التلوث الكيميائي (decontamination)، وغايتها منع نمو البكتيريا الأخرى الموجودة في عينات الأنسجة؛
- نوع أوساط الزرع المختارة لإنماء المتفطرات.
العينة
تأتي أفضل الأنسجة للعزل في الغالب من الفحص بعد الموت (post-mortem) لحيوانات أعطت نتيجة إيجابية في اختبار التوبركولين أو اختبار الإنترفيرون غاما، فتُجمع منها العقد اللمفية غير الطبيعية والأعضاء المتنية (parenchymatous organs) التي تحمل آفات متوافقة مع السل. وإذا غابت الآفات المرضية، ينص دليل WOAH على أخذ عقد لمفية بعينها من الرأس أو الجهاز التنفسي أو الجهاز الهضمي، ويورد مركز الأمن الغذائي والصحة العامة في جامعة ولاية أيوا (CFSPH) أن الحد الأدنى الموصى به في الأبقار الخالية من آفات مرئية عقد لمفية مجمّعة من الرأس والصدر. أما الحيوانات الأليفة وحيوانات الحدائق المشتبه بإصابتها فيمكن فحصها بخزعات من العقد اللمفية أو بمسحات فموية أو بغسيل رغامي قصبي (tracheo-bronchial wash).
المبدأ
في العزل الأولي يُزرع الراسب (sediment) عادة على مجموعة من الأوساط الصلبة أو السائلة أو كليهما، ومن الأوساط الصلبة المعتمدة على البيض لوينشتاين-جنسن (Löwenstein–Jensen) وقاعدة كوليتسوس (Coletsos) وستونبرينك (Stonebrink)، على أن تحتوي البيروفات وحدها أو البيروفات مع الغليسرول. ارتفاع معدل التلوث وتعذّر بناء تشخيص أولي على الصفات الشكلية للمستعمرات هما عيبا الأوساط السائلة، ويقابلهما قِصَر زمن النمو وسرعة نسبية في كشف المتفطرات.
تفسير النتيجة
يتوقف موعد ظهور نمو M. bovis على وسط الزرع المستعمل ووجود آفات متوافقة مع السل وحمولة الجرثومة الأولية في عينة النسيج، وفي العادة يظهر هذا النمو في غضون 3-6 أسابيع من الحضن. ويورد دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) أن المزارع تُحضن عند 37°س، مع ثاني أكسيد الكربون أو دونه، مدة لا تقل عن 6 أسابيع ويُفضَّل أن تبلغ 10-12 أسبوعًا، وقد تمتد إلى 16 أسبوعًا عند الاشتباه في M. microti.