يقوم تشخيص التسمم الدموي النزفي (haemorrhagic septicaemia, HS) على عزل الكائن المسبب Pasteurella multocida، عادةً من دم الحيوان النافق أو نخاع عظمه، والتعرف عليه بالطرق الكيميائية الحيوية والمصلية والجزيئية. ويُجرى العزل البكتيري (bacterial isolation) على دم يؤخذ من الحيوان المريض قبيل النفوق، أو على دم القلب أو نخاع العظام بعده.
العينة
- يحدث تسمم الدم الحقيقي في المرحلة الأخيرة من المرض، ولذا تؤخذ عينات الدم من الحيوانات المريضة قبيل النفوق مباشرة.
- إذا طال الوقت منذ النفوق يُستعان بنخاع العظام الطويلة كالعضد والفخذ والظنبوب، أما دم القلب أو مسحته فلا يصلح إلا فور النفوق.
المبدأ وتفسير النتيجة
- تبدو البكتيريا في لطاخات الدم المصبوغة بصبغة غرام أو ليشمان أو أزرق الميثيلين عصيات قصيرة سالبة الغرام ثنائية القطب في التلوين، لكن الفحص المجهري المباشر وحده لا يكفي لتشخيص قاطع.
- ومن صفاته الزرعية أن عزلاته الحديثة تكوّن على آغار الدم بعد 24 ساعة عند 37°م مستعمرات ملساء لامعة قطرها نحو 1 مم، وأنه لا ينمو على آغار ماكونكي (MacConkey).
- تنتج كائنات المرض الأوكسيداز والكاتالاز والإندول، وتختزل النترات.
- بعد تحديد الجنس والنوع يمكن استعمال إنتاج الهيالورونيداز اختباراً نوعياً لسلالات المرض، علماً أن أنماط B غير B:2 (6:B) والنمط E سلبية الهيالورونيداز.
حدود الطريقة
قد لا يحتوي دم الحيوانات في المراحل المبكرة على البكتيريا، وقد تُخفي المعالجة بالمضادات الحيوية وجودها في الدورة الدموية، ولا يكون الزرع المباشر مُرضياً عادةً إلا مع مادة طازجة خالية من الملوثات.
مقارنة بالاختبارات الأخرى
مع المواد الأنفية أو النسيجية الشديدة التلوث يمكن اللجوء إلى حقن الفئران ملاذاً أخيراً للعزل، كما يمكن التعرف الافتراضي على النمط B المسبب للمرض بتضخيم PCR.
السلامة الحيوية
لا توجد تقارير مؤكدة عن إصابة البشر بالنمطين B:2 وE:2، لكن أنماطاً أخرى تصيبهم، ويقضي دليل WOAH بالتعامل مع الكائن بإجراءات السلامة الحيوية والاحتواء التي يحددها تحليل المخاطر الحيوية. وحتى نشر فصل دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) عام 2021 لم تكن هناك مختبرات مرجعية للمنظمة لهذا المرض.