ما الذي يكشفه الاختبار
يكشف اختبار الانتشار المناعي في هلام الآغار (agar gel immunodiffusion, AGID) مستضدات فيروس طاعون المجترات الصغيرة (peste des petits ruminants virus, PPRV)، وهو من الاختبارات الأقدم في هذا الباب، ويمتاز ببساطته الشديدة وقلة كلفته إلى حد يتيح إجراءه في أي مختبر، بل في الحقل كذلك.
المبدأ
تُثقب في الآغار حفرة مركزية تحيط بها ست حفر على نمط سداسي، قطر كل منها 5 مم والمسافة بين الواحدة والأخرى 5 مم، وتُملأ الحفرة المركزية بمصل مضاد إيجابي (positive antiserum). وتُملأ الحفر الطرفية الست بثلاثة أنواع من المستضد: ثلاث حفر بالمستضد الإيجابي الضابط، وحفرة بالمستضد السلبي، وحفرتان بالمستضد المراد فحصه، بحيث تتناوب حفر الاختبار والمستضد السلبي مع حفر المستضد الإيجابي.
تفسير النتيجة
في غضون 18 إلى 24 ساعة في درجة حرارة الغرفة تظهر عادةً بين المصل والمستضدات خطوط ترسيب (precipitin lines) يتراوح عددها بين خط وثلاثة، ويُحكم بإيجابية التفاعل حين تُشكّل خطوط تطابق (lines of identity) مع المستضد الإيجابي الضابط. ولا تُسجَّل نتيجة سلبية بحسب دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) إلا بعد أن يُغسل الآغار، في كل اختبار يبدو سلبيًا، بحمض الخليك الثلجي (glacial acetic acid) بتركيز 5% مدة 5 دقائق.
متى يُستخدم وحدوده
تظهر النتيجة في يوم واحد، غير أن حساسية الاختبار لا تكفي لرصد الأشكال الخفيفة من المرض بسبب ضآلة ما يُطرح فيها من مستضد فيروسي، وقد يعجز كذلك عن العثور على الكميات الصغيرة من المستضد في المراحل الأولى من سير المرض. ولا يتجاوز ما رصده AGID والرحلان الكهربائي المناعي المعاكس (counter immunoelectrophoresis, CIEP) في أحد المصادر 42.6% من العينات المأخوذة من حيوانات حية أو عند الصفة التشريحية. وقد لجأت المناطق محدودة الموارد تاريخيًا إلى هذه التقنيات البسيطة للتأكيد والإبلاغ، مع أن فيروس طاعون المجترات الصغيرة يتفاعل فيها تفاعلًا متصالبًا مع فيروس طاعون البقر (rinderpest).
مكانه في دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH)
يجعل ملخص دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH) التشخيص المختبري قائمًا على الإليزا بالالتقاط المناعي أو تفاعل البوليميراز المتسلسل، ويذكر AGID والرحلان الكهربائي المناعي المعاكس وسيلتين يمكن استعمالهما أيضًا، إلى جانب اختبار ميداني متاح للاستعمال في الحقل.