ما الذي يكشفه الاختبار
يرصد تفاعل البوليميراز المتسلسل بالنسخ العكسي في الوقت الحقيقي (real-time RT-PCR) فيروس طاعون المجترات الصغيرة (peste des petits ruminants virus, PPRV) في العينات السريرية ويقيس كميته في أثناء التفاعل، وقد حسّنت صيغته الكمية حديثًا طرق تضخيم الأحماض النووية لتشخيص المرض تحسينًا ملحوظًا. ويورد دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH)، في حديثه عن هذه الصيغة الكمية، أنها تفوق RT-PCR التقليدي حساسية بعشر مرات وتقلل خطر التلوث، وأن اختبارًا في الوقت الحقيقي نوعيًا لعترات السلالة الوراثية الرابعة (lineage IV) قد وُصف. وقد بات RT-PCR وصيغته الكمية (RT-qPCR) أوسع الطرق استعمالًا في الكشف عن الفيروس، وتؤكد الأبحاث أن الصيغة الكمية تفوقه في النوعية أيضًا، لا في الحساسية وحدها.
العينة
ينص دليل WOAH على أن الحمض النووي الريبي (RNA) يُنقّى أولًا في جميع الحالات من عينات الدم أو الأنسجة، ويمكن استخلاصه من العقد اللمفية أو اللوزتين أو نسيج الرئة، ومن الدم الكامل أو الطبقة البيضاء (buffy coat) أو اللمفاويات المنقاة من الدم المحيطي (PBLs)، ومن مسحات العين أو الأنف. أما الطحال فليس مثاليًا لارتفاع محتواه من الدم، وتبقى العقد اللمفية المساريقية أثبت المواقع في إعطاء نتيجة إيجابية في الحالات الخفيفة، وتتقدم المسحات الأنفية على مسحات العين والفم في رصد الفيروس، لا سيما عند انخفاض عياره.
متى يُستخدم
يُعدّ RT-PCR في الوقت الحقيقي الطريقةَ المفضلة لدى المختبرات المزودة بالمعدات اللازمة، لكن أيًا من الاختبارات القائمة لم يثبت أنه مُرضٍ مع كل العزلات المختبرة، كما أن ارتفاع كلفة المعدات ومتطلباته التقنية يحدّان من فائدته في البلدان منخفضة الدخل. ويتميز التضخيم المتساوي الحرارة بوساطة الحلقة (loop-mediated isothermal amplification, LAMP)، وهو بديل لـ RT-PCR، بسرعته وسهولة تطبيقه وإمكان قراءة نتيجته بالعين المجردة، مع حساسية تبدو مماثلة لحساسية RT-PCR في الوقت الحقيقي.
تفسير النتيجة
يمكن أن يُربك الطرحُ العابر للفيروس الذي قد يعقب التحصين ضد طاعون المجترات الصغيرة تأكيدَ حالات المرض، مع أن الفيروس المطروح غير مُعدٍ.