يحدد اختبار تعادل الفيروس (virus neutralisation test, VNT) وصيغته القائمة على اختزال اللويحات (plaque reduction neutralisation test, PRNT) وجود الأجسام المضادة المعادِلة لفيروس حمى الوادي المتصدع لدى الحيوانات المصابة طبيعيًا والمحصَّنة. ويذكر دليل WOAH أن هذا الاختبار يصلح لفحص مصل أي نوع حيواني، ويُستعمل عمومًا لقياس فعالية اللقاحات.
المبدأ
يُعدّ PRNT80، أي اختزال اللويحات بنسبة 80% في نظام مزرعة خلوية، المقايسة المعيارية المقبولة عمومًا للتقدير الكمي لنشاط الأجسام المضادة المعادِلة في المصل. ويُجرى اختبار التعادل عادةً بصيغة التعادل الدقيق (micro-neutralisation) في صفائح زراعة نسيجية بلاستيكية من 96 بئرًا. ويُستعمل فيروسًا للتحدي سلالةُ Smithburn العصبية المضعَّفة بشدة المحضَّرة في دماغ الفأر، أو أي سلالة أخرى يُفضَّل أن تكون مضعَّفة.
تفسير النتيجة
في PRNT يُعبَّر عن العيار بأعلى تخفيف للمصل يُحدث اختزالًا بنسبة 80% مقارنةً بعدد لويحات شاهد الفيروس. وفي صيغة التعادل الدقيق يؤخذ العيار مقلوبَ التخفيف الذي لا يظهر عنده أثر اعتلالي خلوي أو يظهر أثر ضئيل (نحو 10%)، ويحدد كل مختبر عيارات القطع وفق نتائج تحققه الداخلي. ويختلف العيار المعدود إيجابيًا باختلاف غرض الاختبار: 1/80 أو 1/100 عتبة مفيدة لقياس مناعية اللقاح، و1/10 أو 1/20 يمكن عدّه إيجابيًا عند تقصي سريان الفيروس في مجموعة حيوانية.
مقارنة بالاختبارات الأخرى
اختبارات التعادل أعلى الاختبارات المصلية التشخيصية نوعيةً، في حين تبقى الإليزا (ELISA) لكشف IgM وIgG أوسع التقنيات استخدامًا حاليًا.
السلامة الحيوية
بحسب دليل المنظمة العالمية لصحة الحيوان (WOAH)، يجب إجراء PRNT في مرافق سلامة حيوية عالية الاحتواء وعلى أيدي عاملين مدربين.
حدود الاختبار
يجري تطوير مقايسات تعادل بديلة والتحقق منها، لا تتطلب التعامل مع الفيروس عالي الضراوة ولا الاحتواء العالي.