ما الذي يكشفه
يبدأ فهم مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) من الخلايا البائية (B cells) في الكريات البيضاء: فهي تنتج أجسامًا مضادة تتآثر كيميائيًا مع المستضدات، وعلى هذا التفاعل بين المستضد والجسم المضاد (antigen–antibody reaction) تقوم المقايسة. وهي صيغة معدلة من المقايسات المناعية، حلّت فيها الإنزيمات محل النظائر المشعة (radioisotopes) لدواعٍ تتعلق بسلامة استعمال الإشعاع، ولهذا تُعرف أيضًا بالمقايسة المناعية الإنزيمية (enzyme immunoassay).
المبدأ
يُثبَّت المستضد على طور صلب (solid phase)، كصفيحة المعايرة الدقيقة (microtiter plate) المصنوعة من البوليستيرين الصلب أو كلوريد البوليفينيل أو البولي بروبيلين. ويدل ظهور اللون بعد إضافة ركيزة مولدة للون (chromogenic substrate) على وجود المستضد. وللمقايسة صيغ عدة، منها:
- الصيغة التنافسية (competitive ELISA): جوهرها أن الهدف الموجود في العينة، مستضدًا كان أو جسمًا مضادًا، ينافس هدفًا مماثلًا موسومًا بإنزيم على الجسم المضاد أو المستضد المثبت، فإذا كان الهدف مستضدًا انخفضت الإشارة كلما زادت كميته في العينة، لأن ما يرتبط من المستضد الموسوم يقل.
- صيغة الساندويتش (sandwich ELISA): يُقبل على نطاق واسع أنها أعلى نوعية وأوسع مدى عمل من الصيغ الأخرى.
تفسير النتيجة
من عيوب الطريقة ارتفاع احتمال النتائج الإيجابية أو السلبية الكاذبة إذا لم يُحجب (blocking) سطح الصفيحة المثبت عليه المستضد حجبًا كافيًا.
في الدواجن ومرض نيوكاسل
تُستعمل مجموعات ELISA التجارية على نحو شائع في الطيور لقياس مستويات الأجسام المضادة لفيروس APMV-1 التي تعقب التحصين، إلى جانب اختبار تثبيط التراص الدموي (haemagglutination inhibition, HI) الذي يظل الأوسع انتشارًا.